Njia ya rangi - uchanganuzi kulingana na ulinganisho wa ujazo wa rangi wa dutu zilizochunguzwa na zinazojulikana. Matokeo ya majaribio ya kimwili na kemikali ni ya thamani kubwa kwa matawi mengi ya sayansi, lakini zaidi ya yote utafiti hutumiwa katika dawa.
Kiini cha mbinu ya kupima rangi
Kuna aina nyingi za vipimo vinavyobainisha muundo wa kemikali wa dutu. Baadhi yao ni zima na hutumiwa sana katika nyanja mbalimbali, wengine ni maalum, na usahihi wa juu. Mbinu ya rangi ni ya ulimwengu wote.
Kiini cha uchanganuzi kiko katika ukweli kwamba ujazo wa rangi wa mmumunyo wenye mkusanyiko usiojulikana unalinganishwa na rangi ya suluhu ya kawaida. Wakati wa uchambuzi, kama matokeo ya mwingiliano wa sehemu iliyochunguzwa na reagent fulani, kiwanja cha rangi huundwa. Baada ya kukamilika kwa majibu, kivuli kinachosababishwa kinalinganishwa na rangi ya ufumbuzi, ambayo mkusanyiko wake tayari unajulikana.
Inaaminika kuwa mwanzilishi wa rangi ni Robert Boyle. Alitumia kubanatannins kutofautisha chuma kutoka kwa shaba katika suluhisho. Ni Boyle aliyegundua kuwa kadiri chuma kilivyokolea zaidi kwenye suluji, ndivyo sauti ya mwisho inavyoongezeka.
Colorimetry
Colorimetry ni mbinu ya kubainisha kiasi cha dutu katika miyeyusho. Uchanganuzi huo unatokana na sheria ya Bouguer-Lambert-Beer: mwangaza unapogonga safu mnene ya kunyonya ya dutu, nguvu yake hudhoofika.
Njia ya kupima rangi ya kubaini mkusanyiko wa dutu inaweza kutumia ulinganisho wa kuona au ulinganisho kwa kutumia ala maalum ili kupima ukubwa wa rangi. Ulinganisho unafanywa kwa njia ya moja kwa moja na ya kufidia.
- Moja kwa moja. Njia hiyo inahusisha kulinganisha kiwango cha rangi ya ufumbuzi wa mtihani kwa wiani fulani na joto la kioevu na ufumbuzi wa kumbukumbu. Wakati wa kutumia photocolorimeters na spectrophotometers, maji yaliyotengenezwa hutumiwa kama suluhisho la kumbukumbu. Vifaa hupima ukubwa wa mkondo, ambayo inategemea ukubwa wa mwanga.
- Fidia. Njia hiyo inategemea kuleta rangi ya sampuli iliyosomwa kwenye kumbukumbu. Matokeo hupatikana kwa kuongeza kiyeyushi au kuongeza urefu wa safu ya kati iliyotiwa madoa.
Matumizi ya spectrophotometer, monochromator na ala zingine za usahihi hurahisisha zaidi mbinu rahisi ya utafiti na hukuruhusu kuongeza usahihi wa matokeo. Vifaa hivi vinaweza kupima kiasi cha upitishaji wa mwanga na kubainisha urefu wa wimbi.
Ambapo uchambuzi unatumika
Njia ya uchanganuzi wa rangi hutumika wakati utungaji halisi wa kemikali unajulikana, kuna sampuli ya marejeleo ya kulinganisha, na halijoto ya jaribio na sampuli ya marejeleo ni sawa. Ikiwa unahitaji kuamua haraka kiasi cha dutu ya rangi, lakini ni ndogo sana kwamba haiwezekani kutumia njia ya uchambuzi.
Colorimetry hutumika sana katika dawa kwa utafiti wa kimatibabu wa biokemikali na maeneo mengine:
- sekta ya dawa;
- sekta ya chakula na pombe;
- agronomia (uamuzi wa ubora wa udongo).
Faida na hasara
Mbinu ya kupima rangi, kama nyingine yoyote, ina faida na hasara.
Faida zake ni pamoja na zifuatazo:
- urahisi wa uchanganuzi, taratibu za chini zaidi za maandalizi;
- uwezekano wa majaribio hata kwa nyenzo kidogo ya majaribio;
- hakuna haja ya vifaa vya gharama kubwa, ingawa vifaa vya kisasa ambavyo si vya bei nafuu vimetumika sana hivi karibuni. Lakini hutoa matokeo sahihi zaidi.
Hasara: usahihi mdogo wa uchanganuzi ikilinganishwa na mbinu za uchanganuzi.
Mbinu ya Biuret ya kubainisha protini
Protini katika seramu ya damu ni kiashirio kinachoakisi hali ya homeostasis. Kuongezeka kwa mkusanyiko wa kiwanja cha macromolecular katika damu huitwa hyperproteinemia, maudhui ya chini huitwa hypoproteinemia.
Protini ndaniseramu ya damu ina muundo tofauti, muundo, mali, hufanya kazi tofauti. Wao umegawanywa katika enzymes, homoni, immunoglobulins na wengine. Vikundi vyote vya protini vina idadi ya sifa zinazofanana, kwa misingi ambayo mbinu zimetengenezwa kwa ajili ya kuamua misombo ya kikaboni ya macromolecular katika maji ya kibiolojia.
Kati ya mbinu zote za biokemia ya kimatibabu, mbinu za rangi za kubainisha protini hutumiwa mara nyingi. Wao ni kiasi cha bei nafuu, ambayo ni muhimu kwa mashirika ya bajeti. na ni rahisi sana. Ya kawaida ni njia ya biuret. Kiini cha njia: protini katika mazingira ya alkali huguswa na sulfate ya shaba na kuunda misombo ya zambarau. Maudhui ya protini katika damu imedhamiriwa na kueneza kwa uchafu. Biomaterial kwa uchambuzi huchukuliwa asubuhi kwenye tumbo tupu.
Uchambuzi ni sahihi sana, lakini kuna sababu zinazoathiri mkusanyiko wa protini katika damu:
- shughuli za kimwili muda mfupi kabla ya sampuli ya biomaterial;
- wiki za mwisho za ujauzito na kunyonyesha;
- matumizi ya dawa za Corticotropin, Miscleron, Clofibrate huongeza kiwango cha protini kwenye damu, na matumizi ya Pyrazinamide na estrogen - kupunguza ukolezi;
- msimamo usio sahihi wa mkono wakati wa sampuli ya biomaterial.
Uamuzi wa chuma
Kiasi cha madini ya chuma kwenye damu ni moja ya viashirio vikuu vya utambuzi wa magonjwa mbalimbali. Dutu hii imejilimbikizia hemoglobini, ambayo inahakikisha usafiri wa oksijeni kwa tishu. KwaUamuzi wa chuma kwa njia ya colorimetric, mara nyingi, suluhisho la bathophenanthroline (0.02%) hutumiwa kama reagent kuu. Biomaterial - seramu bila athari za hemolysis.
Kiini cha mbinu: mwingiliano wa ioni za feri na bathophenanthroline yenye salfa huunda changamano yenye rangi, kueneza kwake ambayo imedhamiriwa kwa picha. Ili kupata suluhisho la wazi, ni muhimu kufuata sheria za sampuli za biomaterial, lakini kwa usahihi kuamua wiani wa macho ya complexes ya chuma-ligand, chuma hutolewa kutoka kwa hemoglobin kwa kutumia hydroxylamine na sabuni (sodium dodecyl sulfate). Matokeo ya mtihani huamua uwepo na kiwango cha patholojia. Mkusanyiko wa kawaida wa chuma unapaswa kuwa:
- 14, 2 – 26.0 µmol/L (wanaume);
- 10, 6- 21, 7 µmol/L (wanawake).
Upungufu wa chuma kwa kawaida huhusishwa na kupoteza damu, ulaji duni wa chakula, au kufyonzwa vibaya kutoka kwa njia ya utumbo.
Kipimo cha cholesterol
Cholesterol ni dutu ya kikaboni inayopatikana katika ukuta wa seli za viumbe vingi, ikiwa ni pamoja na binadamu. Inahitajika kwa uzalishaji wa cholecalciferol na homoni za steroid. Kiwango cha cholesterol cha 3.37-5.2 mmol / L kinachukuliwa kuwa kawaida. Maudhui ya juu ni mojawapo ya sababu kuu za atherosclerosis.
Njia za rangi za kubainisha kolesteroli hukuwezesha kutambua magonjwa ya mishipa katika hatua ya awali. Kulingana na matokeo ya pathoanatomical katika matokeo mabaya ya ischemia, mkusanyiko wa pombe ya lipophilic kwa wagonjwa.ilikuwa 6.5-7.8 mmol/L.
Kanuni ya mbinu ya colorimetric ni kwamba kolesteroli hutiwa oksidi na 3beta-hydroxy-steroid oxidoreductase, ikitoa peroksidi hidrojeni, ambayo hubadilisha p-aminoatipyrine kuwa kiwanja cha rangi. Maudhui ya kolesteroli hubainishwa na kujaa kwa rangi yake.
Wakati wa kufanya mtihani kwa mtoto, ni lazima izingatiwe kuwa mkusanyiko wa cholesterol katika utoto haupaswi kuzidi 4.1 mmol / l.
Mbinu ya enzymatic colorimetric ni ipi?
Vipimo vya kimeng'enya hutegemea matumizi ya vimeng'enya vilivyo na shughuli nyingi. Hutumika sana katika kemia ya uchanganuzi kubainisha vitu mbalimbali - kutoka ioni za nitrate hadi molekuli kuu.
Mbinu za enzymatic (enzymatic) ni mahususi, zinazoruhusu uchanganuzi wa dutu fulani ikiwa kuna dutu zingine zinazofanana katika muundo. Njia za kawaida kulingana na matumizi ya enzyme - glucose oxidase. Mtihani hutumiwa kuamua mkusanyiko wa glucose katika damu. Usahihi wa kipimo huruhusu kutumika kurekebisha kipimo cha mawakala wa hypoglycemic kwa wagonjwa walio na ugonjwa wa kisukari cha aina ya 2.
Njia ya kioksidishaji cha Glucose inachukuliwa kuwa mojawapo ya mbinu bora zaidi za kubainisha glukosi. Damu (capilari) na seramu zinaweza kutumika kama nyenzo ya kibayolojia, lakini plazima inapendekezwa zaidi kwa sababu ina kiwango cha chini cha hematokriti, ambayo huathiri vibaya usahihi wa matokeo.
Njia ya kinetic ya fotoometri hutumiwa zaidi. Asili yake iko katika ukweli kwambauwiano ulioanzishwa wa glucose oxidase na peroxidase, kwa muda fulani baada ya kuanza kwa majibu, kiwango cha malezi ya kiwanja cha rangi kitalingana na kiwango cha glucose katika sampuli. Faida kuu ya mtihani ni kwamba matokeo hayaathiriwa na kuwepo kwa misombo ya tatu katika sampuli. Mbinu hii pia ina shida - vyombo vya kupimia vya gharama kubwa kutoka kwa watengenezaji wa Ujerumani au Uswidi vinahitajika kwa ajili ya jaribio.
Hitimisho
Mbinu ya kupima rangi ni sahihi na ni rahisi kutumia. Matumizi yake katika dawa inaruhusu kutambua mapema ya mabadiliko mbalimbali ya pathological katika mwili. Kwa kuanzishwa kwa teknolojia mpya, mbinu hiyo inaboreshwa na inazidi kuwa maarufu.
