Utafiti wa bakteria una umuhimu mkubwa wa kiutendaji kwa wanadamu. Hadi sasa, idadi kubwa ya prokaryotes imegunduliwa, ambayo hutofautiana kutoka kwa kila mmoja katika pathogenicity, eneo la usambazaji, sura, ukubwa, idadi ya flagella, na vigezo vingine. Kuchunguza aina hii kwa undani, mbinu ya utafiti wa bakteria hutumiwa.
Njia zipi za kuchanganua seli za bakteria?
Ili kubaini ikiwa bakteria ni pathogenic, utamaduni huchunguzwa kwa njia mbalimbali. Miongoni mwao:
1. Mbinu ya bakteria.
2. Mbinu ya bakteria.
3. Mbinu ya kibayolojia.
Mbinu za utafiti wa bakteria na bakteria hutegemea moja kwa moja kufanya kazi na seli za prokaryotic, wakati uchambuzi wa kibayolojia unahitajika ili kuchunguza athari za seli hizo kwenye kiumbe hai cha wanyama wa majaribio. Kulingana na kiwango cha udhihirisho wa ishara fulani za ugonjwa huo, mwanasayansi anaweza kufanyahitimisho kuhusu kuwepo au kutokuwepo kwa bakteria ya pathogenic kwenye sampuli, na pia kuzieneza kwa asili katika mwili wa mnyama ili kupata utamaduni wao na matumizi katika kazi nyingine.
Mbinu ya utafiti wa bakteria ni tofauti na ya bakterioscopic. Katika kwanza, utamaduni ulioandaliwa maalum wa prokariyoti hai hutumiwa kwa uchambuzi, wakati katika pili, kazi inafanywa na seli zilizokufa au hai kwenye slaidi ya kioo.
Hatua za mbinu ya utafiti wa bakteria. Microbiology
Kanuni ya kusoma sifa za tamaduni ya bakteria inaweza kuwa muhimu kwa wanabiolojia ambao wameweka lengo la kusoma seli za prokaryotic, na kwa mafundi wa maabara ambao kazi yao ni kubaini hali ya pathogenicity au isiyo ya pathogenicity ya bakteria, na. kisha tambua mgonjwa.
Njia ya kuchunguza bakteria imegawanywa katika hatua tatu:
1. Kutengwa kwa bakteria kutoka kwa sampuli asili.
2. Kupanda bakteria na kukuza utamaduni safi, kusoma sifa zake.
3. Utafiti wa kina wa seli za bakteria.
Hatua ya kwanza
Sampuli, au kupaka, huchukuliwa kutoka sehemu isiyolipishwa ya chombo cha habari au kutoka kwa mgonjwa. Kwa hivyo, tunapata "cocktail" ya aina nyingi za bakteria ambazo zinapaswa kupandwa kwenye kati ya virutubisho. Wakati mwingine inakuwa inawezekana kutenga mara moja bakteria muhimu, kwa kujua foci yao ya usambazaji katika mwili.
Baada ya siku mbili au tatu, koloni zinazohitajika huchaguliwa nahupandwa kwenye vyombo vya habari imara vya sahani za Petri kwa msaada wa kitanzi cha kuzaa. Maabara nyingi hufanya kazi na mirija ya majaribio, ambayo inaweza kuwa na virutubishi kigumu au kioevu. Hivi ndivyo mbinu ya utafiti wa bakteria katika biolojia inavyofanywa.
Hatua ya pili
Baada ya kupata makundi mahususi ya bakteria, uchambuzi wa moja kwa moja wa jumla na mdogo unafanywa. Vigezo vyote vya makoloni vinapimwa, rangi na sura ya kila mmoja wao imedhamiriwa. Sio kawaida kuhesabu makoloni kwenye sahani ya Petri na kisha kwenye nyenzo za kuanzia. Hii ni muhimu katika uchanganuzi wa bakteria wa pathogenic, idadi ambayo inategemea kiwango cha ugonjwa.
Mbinu ya utafiti wa kibakteria, hatua ya 2 ambayo ni kuchunguza koloni moja moja za vijidudu, inaweza kuhusishwa na mbinu ya kibayolojia ya kuchanganua bakteria. Lengo lingine la kufanya kazi katika hatua hii ni kuongeza kiasi cha nyenzo za chanzo. Hili linaweza kufanywa kwenye kiungo cha virutubisho, au unaweza kufanya majaribio katika vivo juu ya viumbe hai vya majaribio. Bakteria ya pathogenic itaongezeka, na kwa sababu hiyo, damu itakuwa na mamilioni ya seli za prokaryotic. Ni rahisi kutayarisha nyenzo muhimu ya kufanya kazi ya bakteria kutoka kwa damu iliyochukuliwa.
Hatua ya tatu
Sehemu muhimu zaidi ya utafiti ni uamuzi wa sifa za kimofolojia, biokemikali, sumu na antijeni za utamaduni wa bakteria. Kazi hufanywa na tamaduni zilizosafishwa mapema kwenye chombo cha virutubisho, na vile vile kwa maandalizi (mara nyingi hutiwa rangi) chini ya darubini.
Weka umilikibakteria ya pathogenic au nyemelezi kwa kikundi kimoja au kingine cha utaratibu, na pia kuamua upinzani wao kwa madawa ya kulevya, inaruhusu njia ya bacteriological ya utafiti. Hatua ya 3 - antibiotics, i.e. uchambuzi wa tabia ya seli za bakteria katika hali ya maudhui ya dawa katika mazingira.
Utafiti wa ukinzani wa viuavijasumu katika tamaduni fulani ni wa umuhimu mkubwa wa vitendo inapobidi kuagiza dawa zinazohitajika, na muhimu zaidi, zinazofaa kwa mgonjwa fulani. Hapa ndipo mbinu ya utafiti wa bakteria inaweza kusaidia.
Njia ya ukuaji ni nini?
Kwa ukuzaji na uzazi, bakteria lazima ziwe katika kiungo cha virutubisho kilichotayarishwa awali. Kwa uthabiti, zinaweza kuwa kioevu au ngumu, na kwa asili - mboga au mnyama.
Masharti ya kimsingi ya media:
1. Utasa.
2. Uwazi wa juu zaidi.
3. Viashiria bora vya asidi, shinikizo la kiosmotiki, shughuli za maji na maadili mengine ya kibayolojia.
Kupata makoloni yaliyotengwa
1. Njia ya Drygalsky. Inajumuisha ukweli kwamba smear yenye aina mbalimbali za microorganisms hutumiwa kwenye kitanzi cha bakteria. Kitanzi hiki hupitishwa pamoja na sahani ya kwanza ya Petri na kati ya virutubisho. Zaidi ya hayo, bila kubadilisha kitanzi, njia ya nyenzo za mabaki hufanyika kwenye sahani ya pili na ya tatu ya Petri. Kwa hivyo, kwenye sampuli za mwisho za koloni, bakteria hazitapandwa kwa wingi sana, na hivyo kurahisisha uwezo wa kupata zile zinazohitajika kwa kazi.bakteria.
2. Mbinu ya Koch. Inatumia mirija ya majaribio yenye virutubishi vilivyoyeyushwa. Kitanzi au pipette yenye smear ya bakteria huwekwa pale, baada ya hapo yaliyomo ya tube ya mtihani hutiwa kwenye sahani maalum. Agar (au gelatin) huimarisha baada ya muda fulani, na ni rahisi kupata makoloni ya seli zinazohitajika katika unene wake. Ni muhimu kulainisha mchanganyiko wa bakteria kwenye mirija ya majaribio kabla ya kuanza kazi ili mkusanyiko wa vijidudu usiwe juu sana.
Njia ya utafiti ya bakteria, hatua ambazo zinatokana na kutengwa kwa utamaduni unaohitajika wa bakteria, haiwezi kufanya bila njia hizi mbili za kutafuta makoloni yaliyotengwa.
Antibiogram
Kwa mwonekano, athari ya bakteria kwa dawa inaweza kuonekana kwa njia mbili za vitendo:
1. Mbinu ya diski ya karatasi.
2. Kuzalisha bakteria na viuavijasumu katika hali ya kimiminika.
Mbinu ya diski ya karatasi inahitaji utamaduni wa vijidudu ambavyo vimekuzwa kwenye kiungo kigumu cha virutubisho. Kwenye chombo kama hicho weka vipande vichache vya karatasi ya mviringo iliyotiwa ndani ya antibiotics. Ikiwa madawa ya kulevya yanafanikiwa kukabiliana na neutralization ya seli za bakteria, baada ya matibabu hayo kutakuwa na eneo lisilo na makoloni. Ikiwa majibu ya kiuavijasumu ni hasi, bakteria wataishi.
Katika kesi ya kutumia kiungo cha virutubishi kioevu, kwanza tayarisha mirija kadhaa ya majaribio yenye utamaduni wa bakteria wa miyeyusho tofauti. Antibiotics huongezwa kwenye zilizopo za mtihani, na mchakato wa mwingiliano kati ya dutu na microorganisms huzingatiwa wakati wa mchana. Matokeo yake, antibiogram ya ubora wa juu hupatikana, kulingana na ambayo inawezekanatathmini ufanisi wa dawa kwa zao fulani.
Kazi kuu za uchambuzi
Hapa inaorodhesha malengo na hatua za mbinu ya utafiti ya bakteria.
1. Pata nyenzo za kuanzia ambazo zitatumika kutenganisha makoloni ya bakteria. Inaweza kuwa smear kutoka kwa uso wa kitu chochote, utando wa mucous au cavity ya chombo cha binadamu, mtihani wa damu.
2. Ukuzaji wa utamaduni kwenye lishe dhabiti. Baada ya masaa 24-48, makoloni ya aina tofauti za bakteria yanaweza kupatikana kwenye sahani ya Petri. Tunachagua tunayotaka kulingana na vigezo vya kimofolojia na / au biokemikali na kufanya kazi nayo zaidi.
3. Uenezi wa utamaduni unaosababishwa. Njia ya utafiti wa bakteria inaweza kutegemea mbinu ya mitambo au ya kibaolojia ya kuongeza idadi ya tamaduni za bakteria. Katika kesi ya kwanza, kazi inafanywa na vyombo vya habari vya virutubisho imara au kioevu, ambayo bakteria huzidisha katika thermostat na kuunda makoloni mapya. Njia ya kibiolojia inahitaji hali ya asili kwa kuongeza idadi ya bakteria, kwa hiyo hapa mnyama wa majaribio anaambukizwa na microorganisms. Baada ya siku chache, prokariyoti nyingi zinaweza kupatikana katika sampuli ya damu au smear.
4. Kufanya kazi na utamaduni uliotakaswa. Kuamua nafasi ya utaratibu wa bakteria, pamoja na mali yao ya pathogens, ni muhimu kufanya uchambuzi wa kina wa seli kulingana na sifa za morphological na biochemical. Wakati wa kujifunza makundi ya pathogenic ya microorganisms, ni muhimu kujuajinsi antibiotics zinavyofaa.
Hii ilikuwa ni sifa ya jumla ya mbinu ya utafiti wa bakteria.
Vipengele vya uchanganuzi
Sheria kuu ya utafiti wa bakteria ni utasa wa juu zaidi. Ikiwa unafanya kazi na mirija ya majaribio, tamaduni na tamaduni ndogo za bakteria zinapaswa kutekelezwa kwa kutumia tu taa ya roho yenye joto.
Hatua zote za mbinu ya utafiti wa bakteria zinahitaji matumizi ya kitanzi maalum au pipette ya Pasteur. Zana zote mbili lazima zitibiwe kabla ya moto wa taa ya pombe. Kama kwa pipette ya Pasteur, hapa, kabla ya sterilization ya mafuta, ni muhimu kuvunja ncha ya pipette na kibano.
Mbinu ya mbegu za bakteria pia ina sifa zake. Kwanza, wakati wa kuingiza kwenye vyombo vya habari vilivyo imara, kitanzi cha bakteria kinapitishwa juu ya uso wa agar. Kitanzi, bila shaka, kinapaswa kuwa tayari na sampuli ya microorganisms juu ya uso. Uwekaji katika chombo cha utamaduni pia hufanywa, katika hali ambayo kitanzi au pipette inapaswa kufikia sehemu ya chini ya sahani ya Petri.
Unapofanya kazi na media ya kioevu, mirija ya majaribio hutumiwa. Hapa ni muhimu kuhakikisha kwamba vimiminika havigusi kingo za vyombo vya kioo vya maabara au vizuizi, na vyombo vinavyotumika (pipette, kitanzi) havigusi vitu na nyuso za kigeni.
Umuhimu wa mbinu ya utafiti wa kibiolojia
Uchambuzi wa sampuli ya bakteria una matumizi yake ya vitendo. KimsingiNjia ya utafiti wa bakteria inaweza kutumika katika dawa. Kwa mfano, ni muhimu kujifunza microflora ya mgonjwa ili kuanzisha utambuzi sahihi, na pia kuendeleza njia sahihi ya matibabu. Antibiogram husaidia hapa, ambayo itaonyesha shughuli za dawa dhidi ya pathojeni.
Uchambuzi wa bakteria hutumika kwenye maabara kugundua magonjwa hatari kama vile kifua kikuu, homa inayorudi tena au kisonono. Pia hutumika kuchunguza muundo wa bakteria wa tonsils, mashimo ya viungo.
Mbinu ya utafiti wa bakteria inaweza kutumika kubainisha uchafuzi wa mazingira. Kulingana na data juu ya muundo wa kiasi na ubora wa smear kutoka kwa uso wa kitu, kiwango cha wakazi wa mazingira haya na viumbe vidogo hutambuliwa.
