Ili kubaini muundo wa ubora wa bidhaa nyingi za chakula, mmenyuko wa xantoprotein kwa protini hutumiwa. Uwepo wa asidi ya amino yenye kunukia katika mchanganyiko utatoa mabadiliko chanya ya rangi kwenye sampuli ya majaribio.
Protini ni nini
Pia inaitwa protini, ambayo ni nyenzo ya ujenzi kwa kiumbe hai. Protini huhifadhi kiasi cha misuli, kurejesha miundo ya tishu iliyojeruhiwa na iliyokufa ya viungo mbalimbali, iwe ni nywele, ngozi au mishipa. Kwa ushiriki wao, seli nyekundu za damu huzalishwa, utendakazi wa kawaida wa homoni na seli nyingi za mfumo wa kinga hudhibitiwa.
Hii ni molekuli changamano, ambayo ni polipeptidi yenye uzito mkubwa kuliko d altons 6103. Muundo wa protini huundwa na mabaki ya asidi ya amino kwa wingi, iliyounganishwa na kifungo cha peptidi.
Muundo wa protini
Sifa bainifu ya dutu hizi kwa kulinganishwa na peptidi zenye uzito wa chini wa molekuli ni muundo wao wa anga ulioendelezwa wa pande tatu, unaoungwa mkono na mvuto kutoka tofauti.kiwango cha mvuto. Protini zina muundo wa ngazi nne. Kila moja ina sifa zake.
Mpangilio msingi wa molekuli zao unatokana na mfuatano wa asidi ya amino, muundo ambao unatambuliwa na mmenyuko wa xantoprotein kwa protini. Muundo kama huo ni dhamana ya peptidi inayorudiwa mara kwa mara -HN-CH-CO-, na radicals ya mnyororo wa upande katika asidi ya aminocarboxylic ndio sehemu ya kuchagua. Ni wao wanaoamua sifa za dutu hii kwa ujumla katika siku zijazo.
Muundo msingi wa protini unachukuliwa kuwa na nguvu ya kutosha, hii ni kutokana na kuwepo kwa mwingiliano thabiti wa ushirikiano katika vifungo vya peptidi. Uundaji wa viwango vinavyofuata hutokea kulingana na ishara zilizowekwa katika hatua ya awali.
Uundaji wa muundo wa pili unawezekana kutokana na kupinda kwa mfuatano wa asidi ya amino kuwa ond, ambapo vifungo vya hidrojeni huwekwa kati ya zamu.
Kiwango cha juu cha mpangilio wa molekuli huundwa wakati sehemu moja ya helix inapowekwa juu ya vipande vingine na kutokea kwa kila aina ya vifungo kati yao, na mchanganyiko wa hidrojeni, disulfidi, covalent au ioni. Matokeo yake ni miunganisho katika umbo la globules.
Mpangilio wa anga wa miundo ya elimu ya juu yenye uundaji wa vifungo vya kemikali kati yake husababisha uundaji wa umbo la mwisho la molekuli au kiwango cha quaternary.
Amino asidi
Zinabainisha sifa za kemikali za protini. Kuna takriban 20 kuu za amino asidi,imejumuishwa katika muundo wa polipeptidi katika mlolongo tofauti. Hii pia ni pamoja na asidi aminocarboxylic adimu katika umbo la hidroksiprolini na hidroksilisini, ambazo ni mito ya peptidi msingi.
Kama ishara ya mmenyuko wa xantoprotein wa utambuzi wa protini, uwepo wa asidi ya amino ya mtu binafsi hutoa mabadiliko katika rangi ya vitendanishi, ambayo inaonyesha uwepo wa miundo maalum katika muundo wao.
Kama ilivyotokea, zote ni asidi za kaboksili, ambapo atomi ya hidrojeni ilibadilishwa na kikundi cha amino.
Mfano wa muundo wa molekuli ni fomula ya kimuundo ya glycine (HNH− HCH− COOH) kama asidi ya amino rahisi zaidi.
Katika hali hii, mojawapo ya hidrojeni CH2- kaboni inaweza kubadilishwa na radical ndefu zaidi, ikijumuisha pete ya benzini, amino, sulfo, vikundi vya kaboksi.
Mtikio wa xantoprotini unamaanisha nini
Njia tofauti hutumika kwa uchanganuzi wa ubora wa protini. Haya ni pamoja na miitikio:
- biuret yenye rangi ya zambarau;
- ninhydrin kuunda myeyusho wa bluu-violet;
- formaldehyde yenye madoa mekundu;
- Foil yenye mchanga wa kijivu-nyeusi.
Wakati wa kutekeleza kila mbinu, uwepo wa protini na uwepo wa kikundi fulani cha utendaji katika molekuli yao huthibitishwa.
Kuna athari ya xantoprotini kwa protini. Pia inaitwa mtihani wa Mulder. Inahusu athari za rangi kwenye protini, inambazo ni asidi ya amino yenye kunukia na heterocyclic.
Kipengele cha jaribio kama hilo ni mchakato wa nitrati ya mabaki ya mzunguko wa amino asidi na asidi ya nitriki, hasa, kuongezwa kwa kikundi cha nitro kwenye pete ya benzini.
Matokeo ya mchakato huu ni uundaji wa kiwanja cha nitro, ambacho hutiririka. Hii ndiyo ishara kuu ya mmenyuko wa xantoprotein.
Amino asidi gani hubainishwa
Si asidi zote za aminocarboxylic zinaweza kutambuliwa kwa kutumia jaribio hili. Sifa kuu ya mmenyuko wa xantoprotein wa utambuzi wa protini ni kuwepo kwa pete ya benzene au heterocycle katika molekuli ya amino asidi.
Kutoka kwa protini aminocarboxylic asidi, asidi mbili za kunukia zimetengwa, ambamo kuna kundi la phenyl (katika phenylalanine) na hydroxyphenyl radical (katika tyrosine).
Mtikio wa xantoprotein hutumika kubainisha tryptophan ya asidi ya amino ya heterocyclic, ambayo ina kiini chenye kunukia cha indole. Uwepo wa misombo iliyo hapo juu katika protini hutoa mabadiliko ya rangi ya kifaa cha majaribio.
Vitendanishi gani hutumika
Ili kutekeleza mmenyuko wa xantoprotein, utahitaji kuandaa myeyusho 1% wa protini ya yai au mboga.
Kwa kawaida tumia yai la kuku, ambalo limevunjwa ili kutenganisha zaidi protini na pingu. Ili kupata suluhisho, 1% ya protini hupunguzwa kwa mara kumi ya kiasi cha maji yaliyotakaswa. Baada ya kufuta protini, kioevu kinachosababisha lazima kichujwa kupitia tabaka kadhaa za chachi. Suluhisho hili linapaswa kuhifadhiwa mahali pa baridi.
Unaweza kutekeleza majibu kwa kutumia protini ya mboga. Ili kuandaa suluhisho, unga wa ngano hutumiwa kwa kiasi cha kilo 0.04. Ongeza 0.16 l ya maji yaliyotakaswa. Viungo vinachanganywa kwenye chupa, ambayo huwekwa kwa masaa 24 mahali pa baridi na joto la karibu + 1 ° C. Baada ya siku, suluhisho linatikiswa, baada ya hapo huchujwa kwanza na pamba ya pamba, na kisha kwa chujio cha karatasi. Kioevu kinachosababishwa kinawekwa mahali pa baridi. Katika suluhisho kama hilo, kuna sehemu kubwa ya albin.
Ili kutekeleza mmenyuko wa xantoprotein, asidi ya nitriki iliyokolea hutumika kama kitendanishi kikuu. Vitendanishi vya ziada ni myeyusho wa 10% ya hidroksidi ya sodiamu au amonia, myeyusho wa gelatin na phenoli isiyokolea.
Mbinu
Kwenye bomba safi la majaribio ongeza myeyusho 1% wa protini ya yai au unga kwa kiasi cha 2 ml. Takriban matone 9 ya asidi ya nitriki iliyokolea huongezwa ndani yake ili kuzuia flakes kuanguka nje. Mchanganyiko unaosababishwa huwashwa moto, kwa sababu hiyo, mvua hubadilika kuwa njano na kutoweka hatua kwa hatua, na rangi yake huingia kwenye suluhisho.
Kioevu kikipoa, takriban matone 9 ya hidroksidi ya sodiamu iliyokolezwa huongezwa kwenye mirija ya majaribio kando ya ukuta, ambayo ni ziada kwa mchakato huo. Mmenyuko wa kati huwa alkali. Yaliyomo kwenye mrija hubadilika na kuwa chungwa.
Vipengele
Kwa kuwa xantoprotein inaitwa mmenyuko wa ubora kwa protini zilizo chini yakekwa hatua ya asidi ya nitriki, basi mtihani unafanywa chini ya kofia ya mafusho iliyojumuishwa. Zingatia hatua zote za usalama unapofanya kazi na vitu vilivyokolea vya caustic.
Wakati wa mchakato wa kuongeza joto, yaliyomo kwenye bomba yanaweza kutolewa, ambayo inapaswa kuzingatiwa wakati wa kuirekebisha kwenye kishikilia na kuchagua mwelekeo.
Kuchukua asidi ya nitriki iliyokolea na hidroksidi ya sodiamu inapaswa kufanywa tu kwa pipette ya kioo na balbu ya mpira, ni marufuku kuandika kwa mdomo.
Mwitikio wa kulinganisha na phenoli
Ili kuelezea mchakato na kuthibitisha kuwepo kwa kikundi cha phenyl, jaribio kama hilo hufanywa kwa hidroksibenzene.
Anzisha 2 ml ya phenoli iliyoyeyushwa kwenye mirija ya majaribio, kisha hatua kwa hatua, kando ya ukuta, ongeza 2 ml ya asidi ya nitriki iliyokolea. Suluhisho linakabiliwa na joto, kama matokeo ambayo inageuka njano. Mwitikio huu ni wa ubora wa kuwepo kwa pete ya benzene.
Mchakato wa nitration ya hydroxybenzene na asidi ya nitriki huambatana na uundaji wa mchanganyiko wa paranitrophenol na orthonitrophenol katika uwiano wa asilimia 15 hadi 35.
Ulinganisho wa gelatin
Ili kuthibitisha kwamba mmenyuko wa xantoprotini kwa protini hutambua tu asidi ya amino yenye muundo wa kunukia, protini ambazo hazina kundi la phenolic hutumiwa.
Anzisha mmumunyo wa 1% wa gelatin kwa kiasi cha 2 ml kwenye tube safi ya majaribio. Karibu matone 9 ya asidi ya nitriki iliyojilimbikizia huongezwa ndani yake. Mchanganyiko unaosababishwa huwashwa. Suluhisho haina kugeuka njano, ambayo inathibitisha kutokuwepoamino asidi yenye muundo wa kunukia. Umanjano kidogo wa wastani wakati mwingine huzingatiwa kwa sababu ya uwepo wa uchafu wa protini.
Milingano ya kemikali
Mitikio ya xantoprotein kwa protini hufanyika katika hatua mbili. Fomula ya hatua ya kwanza inaelezea mchakato wa nitrati ya molekuli ya amino asidi kwa kutumia asidi ya nitriki iliyokolea.
Mfano ni kuongezwa kwa kikundi cha nitro kwenye tyrosine ili kuunda nitrotyrosine na dinitrotyrosine. Katika hali ya kwanza, moja NO2-radical inaunganishwa kwenye pete ya benzene, na katika kesi ya pili atomi mbili za hidrojeni hubadilishwa na NO2. Fomula ya kemikali ya mmenyuko wa xantoprotein inawakilishwa na mwingiliano wa tyrosine na asidi ya nitriki kuunda molekuli ya nitrotyrosine.
Mchakato wa nitration huambatana na mpito wa rangi isiyo na rangi hadi toni ya njano. Wakati wa kutekeleza majibu sawa na protini zilizo na mabaki ya amino asidi ya tryptophan au phenylalanine, rangi ya suluhu pia hubadilika.
Katika hatua ya pili, bidhaa za nitrati ya molekuli ya tyrosine, hasa nitrotyrosine, hutangamana na ammoniamu au hidroksidi ya sodiamu. Matokeo yake ni chumvi ya sodiamu au amonia, ambayo ina rangi ya njano-machungwa. Mwitikio huu unahusishwa na uwezo wa molekuli ya nitrotyrosine kupita kwenye fomu ya quinoid. Baadaye, chumvi ya asidi ya nitroniki hutengenezwa kutokana nayo, ambayo ina mfumo wa kwinoni wa vifungo viwili vilivyounganishwa.
Hivi ndivyo jinsi mmenyuko wa xantoprotein kwa protini huisha. Mlinganyo wa Pilihatua imewasilishwa hapo juu.
matokeo
Wakati wa uchanganuzi wa vimiminika vilivyo katika mirija mitatu ya majaribio, fenoli ya dilute hutumika kama suluhu ya marejeleo. Dutu zilizo na pete ya benzini hutoa mmenyuko wa ubora na asidi ya nitriki. Kwa hivyo, rangi ya suluhisho hubadilika.
Kama unavyojua, gelatin inajumuisha kolajeni katika umbo la hidrolisisi. Protini hii haina asidi ya aminocarboxylic yenye kunukia. Wakati wa kuingiliana na asidi, hakuna mabadiliko katika rangi ya kati.
Katika mirija ya tatu ya majaribio, mmenyuko chanya wa xantoprotein kwa protini huzingatiwa. Hitimisho linaweza kutolewa kama ifuatavyo: protini zote zilizo na muundo wa kunukia, iwe ni kikundi cha phenyl au pete ya indole, hutoa mabadiliko ya rangi kwenye suluhisho. Hii ni kutokana na kutengenezwa kwa misombo ya nitro ya njano.
Kutekeleza athari ya rangi huthibitisha kuwepo kwa aina mbalimbali za miundo ya kemikali katika asidi ya amino na protini. Mfano wa gelatin unaonyesha kuwa ina asidi aminocarboxylic ambayo haina kundi la phenyl au muundo wa mzunguko.
Mtikio wa xantoprotein unaweza kueleza ngozi kuwa ya njano wakati asidi kali ya nitriki inapowekwa. Povu ya maziwa itapata rangi sawa wakati uchambuzi kama huo unafanywa nayo.
Katika mazoezi ya maabara ya matibabu, sampuli hii ya rangi haitumiwi kutambua protini kwenye mkojo. Hii ni kutokana na rangi ya njano ya mkojo wenyewe.
Mtikio wa xantoprotein umezidi kutumiwa kutathmini amino asidi kama vile tryptophan na tyrosine katika protini mbalimbali.
